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SimpleChIP® Universal qPCR Master Mix
ChIP Kits & Reagents
Buffer

SimpleChIP® Universal qPCR Master Mix #88989

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  1. ChIP
Chromatin Immunoprecipitation Image 1: SimpleChIP® Universal qPCR Master Mix
FIGURE 1. Amplification plot (left) and regression curve (right) of a serial dilution of input DNA samples. Input DNA was prepared and purified from HCT 116 cells using SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005. Quantitative PCR was performed with 20 (red line), 4 (orange line), 0.8 (purple line), and 0.016 ng (blue line) of input DNA and SimpleChIP® Human RPL30 Exon 3 Primers #7014. Data is shown for two replicates.
Chromatin Immunoprecipitation Image 2: SimpleChIP® Universal qPCR Master Mix
FIGURE 2. Corresponding single melt peak of primers. Quantitative PCR was performed with input DNA sample from HCT 116 cells prepared by SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 and either SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 (red line), SimpleChIP® Human RPL30 Exon 3 Primers #7014 (orange line), SimpleChIP® Human CaMK2D Intron 3 Primers #5111 (purple line), or human c-MYC promoter primers (blue line). Data for two replicates is shown for each primer set.
Chromatin Immunoprecipitation Image 3: SimpleChIP® Universal qPCR Master Mix
FIGURE 3. Quantitation of ChIP DNA enriched using SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005. Chromatin immunoprecipitations were performed with cross-linked chromatin from 4 x 106 HCT 116 cells and Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb #9751 (left panel), TCF4/TCF7L2 (C48H11) Rabbit mAb #2569 (right panel), and Normal Rabbit IgG #2729 (both panels). The enriched DNA was quantified by real-time PCR using either SimpleChIP® Human RPL30 Exon 3 Primers #7014, human c-Myc promoter primers, SimpleChIP® Human CaMK2D Intron 3 Primers #5111, or SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486. The amount of immunoprecipitated DNA in each sample is represented as signal relative to the total amount of input chromatin, which is equivalent to one.

Storage

This product is stable for 12 months when stored at -20°C and protected from light. It is stable for up to 30 freeze/thaw cycles and can be stored at 4°C, protected from light, for up to 1 month.

Product Description

The SimpleChIP® Universal qPCR Master Mix is an optimized 2X reaction mix for real-time qPCR detection and quantitation of target DNA sequences using the SYBR/FAM channel of most real-time qPCR instruments. It contains Hot Start Taq DNA Polymerase and has been formulated with a unique passive reference dye that is compatible across a variety of instrument platforms (including those that require a high or low ROX reference signal). It also features dUTP for carryover prevention and a non-fluorescent, visible dye to monitor reaction setup. This dye does not spectrally overlap with fluorescent dyes used for qPCR and will not interfere with real-time detection. This product is provided in 1 ml volumes sufficient for preparation of 100 qPCR reactions, and is compatible with both enzymatic and sonication-fragmented DNA samples from SimpleChIP® enzymatic and sonication ChIP kits. This master mix formulation is supplied at 2X concentration and contains all PCR components required for amplification and quantitation of DNA, except primers and a DNA template.

Background

Dye-based quantitative PCR (qPCR) uses real-time fluorescence of a double-stranded DNA (dsDNA) binding dye, most commonly SYBR® Green I, to measure DNA amplification as it occurs during each cycle of PCR. At a point where the fluorescence signal is confidently detected over the background fluorescence, a quantification cycle, or CT value, can be determined. CT values can be used to evaluate relative target abundance between two or more samples, or to calculate absolute target quantities in reference to an appropriate standard curve, derived from a series of known dilutions. qPCR is commonly used to detect and quantify target genes in genomic DNA that is enriched by chromatin immunoprecipitation (ChIP).

使用に関する制限

法的な権限を与えられたCSTの担当者が署名した書面によって別途明示的に合意された場合を除き、 CST、その関連会社または代理店が提供する製品には以下の条件が適用されます。お客様が定める条件でここに定められた条件に含まれるものを超えるもの、 または、ここに定められた条件と異なるものは、法的な権限を与えられたCSTの担当者が別途書面にて受諾した場合を除き、拒絶され、 いかなる効力も効果も有しません。

研究専用 (For Research Use Only) またはこれに類似する表示がされた製品は、 いかなる目的についても FDA または外国もしくは国内のその他の規制機関により承認、認可または許可を受けていません。 お客様は製品を診断もしくは治療目的で使用してはならず、また、製品に表示された内容に違反する方法で使用してはなりません。 CST が販売または使用許諾する製品は、エンドユーザーであるお客様に対し、使途を研究および開発のみに限定して提供されるものです。 診断、予防もしくは治療目的で製品を使用することまたは製品を再販売 (単独であるか他の製品等の一部であるかを問いません) もしくはその他の商業的利用の目的で購入することについては、CST から別途許諾を得る必要があります。 お客様は以下の事項を遵守しなければなりません。(a) CST の製品 (単独であるか他の資材と一緒であるかを問いません) を販売、使用許諾、貸与、寄付もしくはその他の態様で第三者に譲渡したり使用させたりしてはなりません。また、商用の製品を製造するために CST の製品を使用してはなりません。(b) 複製、改変、リバースエンジニアリング、逆コンパイル、 分解または他の方法により製品の構造または技術を解明しようとしてはなりません。また、 CST の製品またはサービスと競合する製品またはサービスを開発する目的で CST の製品を使用してはなりません。(c) CST の製品の商標、商号、ロゴ、特許または著作権に関する通知または表示を除去したり改変したりしてはなりません。(d) CST の製品をCST 製品販売条件(CST’s Product Terms of Sale) および該当する書面のみに従って使用しなければなりません。(e) CST の製品に関連してお客様が使用する第三者の製品またはサービスに関する使用許諾条件、 サービス提供条件またはこれに類する合意事項を遵守しなければなりません。

For Research Use Only. Not For Use In Diagnostic Procedures.
Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
SimpleChIP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
SYBR is a registered trademark of Molecular Probes, Inc.
To Purchase # 88989S
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